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[求助]
重疊延伸PCR
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各位大俠： 我要做三個(gè)片段進(jìn)行重疊延伸PCR將他們連接起來成一個(gè)長(zhǎng)片段，引物該如何設(shè)計(jì)？長(zhǎng)度應(yīng)該是多少？ |
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史前五百年
金蟲 (正式寫手)
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3樓2013-07-26 10:13:50
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【答案】應(yīng)助回帖
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761429495(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩，gy版熱心腸 2013-07-25 23:26:08
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761429495(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩，gy版熱心腸 2013-07-25 23:26:08
| 三個(gè)片段，假設(shè)是A，B，C，設(shè)計(jì)引物是AB有一段overlap，BC有一段overlap，overlap我做過最短18bp的，一般25bp，基因特異引物就是普通的設(shè)計(jì)方法，跑PCR時(shí)，AB fusion，BCfusion，然后跑膠回收，將AB 和BC一起跑，這個(gè)描述起來，對(duì)我來說很復(fù)雜，諒解哈 |
2樓2013-07-25 16:09:18
huoyongting
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4樓2013-07-26 15:19:44
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5樓2013-07-26 16:55:01
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