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學(xué)術(shù)問(wèn)題銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
熒光定量和半定量的問(wèn)題？？急！！在線等回復(fù)
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| 我基因做半定量 條帶不是太好。 我的半定量做了好幾次了，效果就是不好，不知道是什么原因啊 ，可能是引物的問(wèn)題。 我想請(qǐng)問(wèn)可不可以直接做熒光相對(duì)定量實(shí)驗(yàn)啊，我想這樣的話 我的引物有沒(méi)有二聚體，有沒(méi)有非特異性擴(kuò)增就一目了然了啊。引物不行就直接換引物了， 我說(shuō)的對(duì)不對(duì)啊？？？ 在線等答案………………………… |
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cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩 2013-07-28 16:04:40
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| 我不知道你說(shuō)的半定量條帶不好是指有引物二聚體，或者是有其它非特異條帶？如果你做半定量PCR時(shí)能看到引物二聚體，直接說(shuō)明引物不好，根本不用試熒光定量。因?yàn)闊晒舛糠浅ｌ`敏，如果膠上能看到的話熒光肯定能檢測(cè)到引物的熔解峰。如果有非特異條帶，經(jīng)優(yōu)化退火溫度仍然不能去掉，也說(shuō)明引物不好，直接換引物。 |
2樓2013-07-28 11:18:26
學(xué)術(shù)問(wèn)題
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3樓2013-07-28 17:08:11
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4樓2013-07-28 23:09:59
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5樓2013-07-29 08:12:10
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7樓2013-07-29 09:58:59
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8樓2013-07-29 21:26:40
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