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ni柱純化問(wèn)題 已有1人參與
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大家好,我最近用金斯瑞的Ni柱純化我的蛋白(帶His6),上樣過(guò)程會(huì)穿過(guò)挺多,吸附也較弱(說(shuō)明書(shū)上的緩沖液 Lysis Equilibration Buffer (LE buffer): 50 mM NaH 2 PO4, 300 mM NaCl, pH 8.0 Wash Buffer: 50 mM NaH 2 PO4, 300 mM NaCl, 10 mM imidazole, pH 8.0 Elution buffer: 50 mM NaH 2 PO4, 300 mM NaCl, 250 mM imidazole, pH 8.0 就是用10mM咪唑洗雜,我用10mM咪唑基本洗脫了),想問(wèn)大家,Ni柱有哪些上樣方式,可以把柱材和我樣品混勻過(guò)夜,第二天裝柱嗎?大家平時(shí)還用什么緩沖液效果好,謝謝大家 |
蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)

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