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xuelin1987銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR退火溫度的確定
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各位，我做分子是新手，這兩天在做目的引物的退火溫度梯度試驗(yàn)，就是確定引物的最佳退火溫度，我P出來后的電泳圖見附件，我想問的是：在引物2那個(gè)圖中，我用的是同一個(gè)引物，同一個(gè)樣品模板，為什么P了以后產(chǎn)物不在一條直線上？而是傾斜的？是不是沒有P出來��？還是操作問題？還有就是如果P出來了，那亮度我感覺都差不多，我要選哪個(gè)溫度作為退火溫度啊？是不是我選的溫度差距有點(diǎn)小，所以P出來后條帶亮度差異不大？呵呵，問題有點(diǎn)多哈，請(qǐng)各位大俠幫幫忙，大恩不言謝��！ 引物2溫度梯度試驗(yàn).JPG.JPG |
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15879003030
銅蟲 (小有名氣)
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4樓2013-08-18 15:43:45
2樓2013-08-18 13:52:35
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條帶斜，沒關(guān)系，只要你把膠放好，不是你認(rèn)為造成的就可以。不同的退火溫度，擴(kuò)出來的就有可能不一樣的大小啊。如果是高保真酶，差別可能大一些，而普通的Taq酶，差別就沒那么大。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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xuelin19873樓2013-08-18 13:56:39
xuelin1987
銅蟲 (小有名氣)
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5樓2013-08-21 15:50:34
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