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常賀坦

新蟲 (初入文壇)

應助: 0 (幼兒園)
金幣: 2.5
散金: 1
帖子: 2
在線: 10.7小時
蟲號: 2603160
注冊: 2013-08-18
專業(yè): 農業(yè)昆蟲學

[求助] 片段驗證不出來

我有一個基因的片段，在不同位置設計了引物，可是怎么都驗證不出來它，基本上就沒P出條帶，求解。下面是基因的序列TGGTGATAAATTAGTGAAGCAAATGTTATTGTTCTTTTGTGTTTCAGTAAAAAAAATAAAAATAGCAACACTATGTATATACACTATTTATATAGACGTAATAGTATGTTAAAGTAGTACTAATCATTCTTTGTTTATTTATATTCCTGTCTGTCTCTTCTTATTGCAAAACAGTGAACTATTAATCTAATAAATTATTTAGGGGGTGAAAATCTATTAAAAGTATGAAAAGTTCTGATCAGAAACTGGGGCCCAATTCTCGCGGCATAGATATTATATCACCTTCGATATATATCGAATGATCTGGCTTTTATCGAAGGAAAACCTTTTTGCCCTATTCTCACCATGTCGCAATAGATATTTATCTACGGATGATCAGTAGACATACATCGACTGGTAAAGAGCCTTCGATATATAAATATCTATGGATCTTGGCATGTCAATCTTGTTATTTCCACTTTTTTTACCTATTATTTATTGTGTTGTCGTGTGTCTTTGCCAATTATTGTTACCTCAAGATGTTGTTAACTGCCTTCATAAATAATTAGTAAATAAAGAAGTAGGTAAACAATGGTGTCGATTCTGGCGTGATTCTCTAAACTTAAAACTAAATTTAACATCAGTCTCTCCTTTTCATTCTGTATAGAGAATGACAAGGATACACTGTTGTCAAATTTAAGTTTAGGTTTAGAGAATCATGCTAGAATCGACACCATTGAAAAATCTAGAGACTAGGAAGTTTTATTTACTGGCTGTTTTTCTATTATCTACGTTTCAGATGTATGAAACTGTAGATCTCTTCTCAAGACTTTACACTATACTAATGATTAATATGATGGTCGGAGGAATGATTCTCTTTAATCTGACTCCATTATACAGCAACTATAAAAACGGTGTTTTCTCTAAGAACCCACCCGAAAACGTAACTTATGCGTATTCTGTCACTTACTCAGTACCAGGATTTAATTTTTATGAGCATTTTACACTGACGACAATTTTGAATTGGATCATGAGCTACGACGTTTCAGTAAATGTCTGTGTAAAAGATCTGTATTTATCATTTCTTGTATTTCAAATAATTGGCCACATACAAATCTTAAAATACAATCTAGAACATTTTCCTAAGCCTAAAAATCAAGCGACTAATCGTTTTGACGCTGAAGAGAATAAGCAGATACGAAAAACGATCGCCGAGTGTGTTGATCACCATCGATTAATAGTAAGTTTCGCAGATGACGTATCAGATTTCTACGGTCCCATGCTTGCTTTAAATTATATGTACCATTTAATTAGTTGCTGCCTTTTACTTCTAGAATGCTCGCAGAAGGAACCCGATGCCTTAGCACGTTACGGACCGCTTACAGTTATTATATTCGGTCAGTTGATTTCAGTGTCCGTTGTATTTGAAATCGTTGAAACGAAGGTAAAATCAACTAAATATGGGGCTAATTGCCTAACTTTAACTCTTTCCATGGTCCCATTCAGCAAGTGAGAATGAAACATAAGCTATTATTTAATAAGCTAATCTTTTTCCTAAATATGAAATTAATGAATGACCGCGCCCGAGTTACAGCTACACAATAAGCCCCCGAGTTCACTACTATACCTTGACTCCACTACAAAACTACCTTTAACCTAATAAGACAGACACATCGAAACCAATAAGTAATTATTTTATACCTTAAGTTCCTTCCCAACTAACATAGGTACTTGTGAAAAATGAAGTATTCCTTATAGCTCCAATGTCTATAATGGTGACATGATGGTGTCAAGATTAGGTACGAGTTCGAAAATAGCTCATGGTTTCATTTGCATGGAATAGCAGAATCCTAAGCAGGGCTTGATTTAATGCAGGGCAGACGGGGCTCTGGAAAAAATTGCTTTTGAGCTCGTAAAATTACATTTTTAAATAACTATTCTATAGTTCTCTATAGACTCCATAGTCTGCAGTGTATCATGATAGTATAGGTATTTGGTAAACCAATACAAAATAGAAATGAAATCAAAGAAAATTCTTCCTATGAGCGGTACTACAATATCAGAG

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1樓 2013-08-25 10:26:19

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xwchen24

金蟲 (小有名氣)

應助: 11 (小學生)
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專業(yè): 發(fā)育生物學

【答案】應助回帖

★
感謝參與，應助指數(shù) +1
常賀坦(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 贈人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-25 12:13:12

1. 確定這個基因確實在你的模版中表達
2. 確定模版的質量，用別的引物P下看看
3. 改進PCR反應條件，你可以用下Touch-Down PCR,好使。

贊一下

回復此樓

2樓2013-08-25 10:35:11