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doubleping新蟲 (小有名氣)
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[求助]
DGGE跑膠問題
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這兩次做DGGE竟然沒有條帶出來(lái)，很郁悶�。�！ 我這里是用伯樂公司的7升的DGGE儀器，這兩天內(nèi)槽有點(diǎn)漏緩沖液，很糾結(jié)才弄好一點(diǎn)，緩沖液漏的不會(huì)那么快，做出來(lái)的結(jié)果卻沒有條帶！仔細(xì)想想跟之前只是樣品以前是放-20℃，現(xiàn)在放4℃，但是樣品也是前兩天才P出來(lái)的，昨天拿去瓊脂糖檢測(cè)還是很亮的，再有一個(gè)就是可能重新?lián)Q過緩沖液，可是我有點(diǎn)marker，染色后也挺亮的，自己琢磨了兩天，實(shí)在不知道是什么問題，這兩天也在等工程師修儀器，所以一直沒做實(shí)驗(yàn)，但是心里沒底啊，到底是什么原因呢？請(qǐng)各位幫我一起找找，謝謝啦 |
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2樓2013-09-08 10:54:37
anney1007
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3樓2013-09-09 17:18:33
doubleping
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4樓2013-09-10 10:57:55
doubleping
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5樓2013-09-10 10:58:28
6樓2013-09-10 17:56:20
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流經(jīng)驗(yàn)！ 2013-09-30 22:11:46
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我以前也遇到過類似問題，后來(lái)找了三個(gè)可能的原因：1是加樣孔漏液，你的PCR產(chǎn)物直接就漏到緩沖液里了，而沒有進(jìn)入電泳膠；2是膠的濃度可能有問題，PCR產(chǎn)物直接就跑出去了，這種情況下一般會(huì)有電泳拖尾的泳道痕跡；3可能是電源不合適，但這個(gè)可能性只是我的猜測(cè)。 我當(dāng)時(shí)出現(xiàn)這種情況的原因很有可能是第一種，就是往電泳槽里放膠板的時(shí)候，加樣的地方?jīng)]有密封好，所以膠特別干凈。 |
7樓2013-09-11 09:33:13
doubleping
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8樓2013-09-11 15:58:37
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