 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 973 | 回復(fù): 3 | |||
[求助]
1M Tris溶解多肽為什么溶液變粘稠？
|
|
RT，我無(wú)意中拿了1M的Tris-Hcl 溶解了一個(gè)多肽，結(jié)果溶液變的粘稠，而用10mM的Tris以及hepes、NaAC-HAC這些緩沖液溶解都沒(méi)有類似的情況。這個(gè)1M Tris溶的肽我拿去和銅離子滴定，發(fā)現(xiàn)有結(jié)合，而溶在其他buffer里的同樣的肽卻沒(méi)有結(jié)合，這是什么原因？是因?yàn)檫@個(gè)肽只有在這么高濃度的tris里才能有特定的結(jié)構(gòu)和銅結(jié)合還是高濃度的Tris和肽發(fā)生了什么反應(yīng)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)儀器誤判，和銅無(wú)關(guān)？ 我的這個(gè)肽長(zhǎng)24個(gè)aa，偏堿性，偏親水性。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
本人考085602 化學(xué)工程 專碩
已經(jīng)有23人回復(fù)
-
求調(diào)劑院校信息
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085600材料與化工306
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
286求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
328求調(diào)劑，英語(yǔ)六級(jí)551，有科研經(jīng)歷
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
一志愿北京化工大學(xué)070300 學(xué)碩336求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
286分人工智能專業(yè)請(qǐng)求調(diào)劑愿意跨考！
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
資源與環(huán)境 調(diào)劑申請(qǐng)(333分)
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
280求調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
269專碩求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 實(shí)驗(yàn)室化學(xué)品純化手冊(cè)
已經(jīng)有876人回復(fù)
- 革蘭氏陰性菌質(zhì)粒提取
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 質(zhì)粒DNA的分離、純化和鑒定
已經(jīng)有32人回復(fù)
- 酶活測(cè)定中的緩沖液
已經(jīng)有4人回復(fù)
- CTAB法提取真菌DNA，得到白色乳膠狀透明沉淀，TE不溶。。。。
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 斑馬魚原位雜交用Fast Red染色有什么方法降低背景顏色？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 測(cè)酶活
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 高質(zhì)量DNA獲取方法之月桂酸鈉法（轉(zhuǎn)）
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 面團(tuán)中自由巰基含量測(cè)定
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 如何去除RNA提取過(guò)程中的蛋白質(zhì)污染
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 酶純化過(guò)程中硫酸銨沉淀后酶活力沒(méi)有了的原因
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 透析 蛋白沉淀 復(fù)性
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 生物實(shí)驗(yàn)常用試劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【資料】分子生物學(xué)常見(jiàn)問(wèn)題解答
已經(jīng)有30人回復(fù)
- 【分享】質(zhì)粒提取原理（轉(zhuǎn)）
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【分享】堿法提取質(zhì)粒的原理
已經(jīng)有20人回復(fù)
hl16010921
木蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 7
- 應(yīng)助: 100 (初中生)
- 金幣: 2218.4
- 紅花: 8
- 帖子: 343
- 在線: 285.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 2514830
- 注冊(cè): 2013-06-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wizardfan: 金幣+2, 謝謝分析，歡迎交流 2013-09-14 07:05:23
luba: 金幣+5, ★★★★★最佳答案, 非常感謝！我按你說(shuō)的試試！ 2013-09-15 22:12:54
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wizardfan: 金幣+2, 謝謝分析，歡迎交流 2013-09-14 07:05:23
luba: 金幣+5, ★★★★★最佳答案, 非常感謝！我按你說(shuō)的試試！ 2013-09-15 22:12:54
| 1。tris本身含氨基，能和銅絡(luò)合。2.1M的tris本身就有點(diǎn)粘，但不明顯，可能是多肽在水中溶解度有限，而tris競(jìng)爭(zhēng)了大量的氫鍵導(dǎo)致肽成凝膠狀，估計(jì)再加tris，肽就要析出了。3.不排除多肽在高鹽情況下出現(xiàn)了組裝，或形成了特定的高級(jí)結(jié)構(gòu)。4.LZ可以用相應(yīng)離子強(qiáng)度的非氨體系試試能否重復(fù)出這個(gè)結(jié)果，再試試無(wú)機(jī)氨體系，看是不是Tris的專有反應(yīng)（Tris含氨基和羥基，都可以配位Cu) |
2樓2013-09-13 13:59:59
|
我用空白的1Mtris和銅滴定沒(méi)有峰出現(xiàn)。我用幾個(gè)位點(diǎn)突變了的此肽溶于1Mtris和銅滴定也沒(méi)有峰。。�？瓷先ニ坪踹�是和此肽有關(guān)。不過(guò)我這個(gè)肽是在公司合成的，拿到手的時(shí)候感覺(jué)沒(méi)有凍干，不是那種凍干粉的狀態(tài)，而是冰塊狀，然后我拿這個(gè)肽去做出了那次有峰的結(jié)果，后來(lái)我覺(jué)得這個(gè)肽不保險(xiǎn)，就讓公司重新凍干了（還是冰塊狀，但是體積縮�。┲蠼o我，我再去拿了用10mM的Tris溶了就做不出來(lái)了。那銷售說(shuō)可能第一次的里面會(huì)殘留有乙腈，但是技術(shù)卻一口咬定不會(huì)有乙腈。我對(duì)這個(gè)合成不懂，似乎是用反相色譜，報(bào)告單上寫著A相是TFA。。乙腈應(yīng)該是能和銅結(jié)合的，不過(guò)凍在-80度里乙腈不會(huì)揮發(fā)掉嗎？而且就算有殘余稀釋到實(shí)驗(yàn)濃度時(shí)是不是已經(jīng)很少了？。不知道是因?yàn)榈谝淮蔚碾睦锩嬗幸译娉霈F(xiàn)了假象，還是因?yàn)榈诙慰桃庠偃龈墒沟么穗氖艿搅似茐�。。。。糾結(jié)無(wú)比，難道此實(shí)驗(yàn)將永無(wú)定論？  |
3樓2013-09-18 09:43:01
hl16010921
木蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 7
- 應(yīng)助: 100 (初中生)
- 金幣: 2218.4
- 紅花: 8
- 帖子: 343
- 在線: 285.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 2514830
- 注冊(cè): 2013-06-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
| 1.一般凍干前會(huì)旋蒸掉乙腈和TFA，否則傷凍干機(jī)，但由于TFA和多肽的氨基成鹽會(huì)殘余一些。2.一般只要不反復(fù)凍融多肽還是穩(wěn)定的。凍干不會(huì)影響多肽的。3.會(huì)不會(huì)和肽的濃度有關(guān)，因?yàn)槎嚯牡臓顟B(tài)不同質(zhì)量稱量可能誤差很大。建議用紫外光譜看看定一下濃度（如果用HPLC定量更準(zhǔn)）4.先別急，先想好兩次實(shí)驗(yàn)的差異，再一個(gè)因素一個(gè)因素的加上去。tris-HCl pH值是不變的，乙腈可能會(huì)對(duì)多肽的結(jié)構(gòu)有影響，摻入微量的乙腈試試。另外該肽有無(wú)半胱氨酸這樣的不穩(wěn)定氨基酸或二硫鍵，穩(wěn)定性如何？實(shí)在不行也別放在心上，畢竟只是意外的收獲，原定的實(shí)驗(yàn)計(jì)劃還是主要的。 |
4樓2013-09-18 10:09:36
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 luba 的主題更新
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料學(xué)碩301分求調(diào)劑 +7 | Liyouyumairs 2026-03-21 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +13 | 冬十三 2026-03-15 | 14/700 |
|
|
[考研] 【考研調(diào)劑】化學(xué)專業(yè) 281分，一志愿四川大學(xué)，誠(chéng)心求調(diào)劑 +11 | 吃吃吃才有意義 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | Mqqqqqq 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +3 | Jack?k?y 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 臨澤境llllll 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +10 | 冷笙123 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑材料與化工專碩 +15 | 陌の森林 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 司空. 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 材料與化工 322求調(diào)劑
+4
|
然11 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩297已過(guò)四六級(jí)求調(diào)劑推薦 +11 | adaie 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +4 | Stella_Yao 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑 +10 | Liwangman 2026-03-15 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限 +5 | share_joy 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
0854，計(jì)算機(jī)類招收調(diào)劑
+3
|
胡辣湯放糖 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)071000 329分求調(diào)劑 +3 | 我愛(ài)生物生物愛(ài)?/a> 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | p asserby. 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 文思客 2026-03-16 | 7/350 |
|