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[交流]
如何做分步雙酶切 已有6人參與
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| 第一個(gè)酶切完跑膠回收?那豈不是濃度會(huì)很降低?不跑膠回收的話,熱失活完直接加第二種酶?那與之對(duì)應(yīng)的buffer怎么加呢?請(qǐng)賜教。。!越詳細(xì)越好。。。 |
銀蟲 (小有名氣)

金蟲 (小有名氣)
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1.明確你酶切的是什么。載體?還是PCR產(chǎn)物? 載體:酚/氯仿抽提或核酸純化試劑盒回收,這樣回收效率應(yīng)該比膠回收高。然后再進(jìn)行下一步單酶切,純化試劑盒或膠回收。 PCR產(chǎn)物:跑膠,若無(wú)二聚體,核酸純化試劑盒回收比較好,當(dāng)然,無(wú)論有無(wú)二聚體,膠回收肯定都沒(méi)有問(wèn)題。然后,分步單酶切與載體相同操作,酚/氯仿或試劑盒。純化試劑盒一定要注意,要弄清楚能回收多大的片段。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] [ Last edited by ykluuniu on 2013-9-10 at 22:56 ] |
新蟲 (初入文壇)
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