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[交流]
引物設(shè)計(jì)的原則 已有2人參與
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引物設(shè)計(jì)是最基礎(chǔ)的分子實(shí)驗(yàn)的必修課。引物設(shè)計(jì)一般情況下需要遵守以下原則： 1：引物最好在模板CDNA的保守區(qū)域設(shè)計(jì) 2：引物長度一般在15-30個(gè)堿基之間 3：引物中的GC含量一般在40%-60%之間，Tm值最好接近72攝氏度 4：引物中3撇段要避開密碼子的第三位，最好選擇T開頭 5：堿基要隨機(jī)分配，盡量不要出現(xiàn)連續(xù)的三個(gè)一致。 6：引物自身及引物之間不存在堿基互補(bǔ)配對 7：引物的5撇端和中間的吉布斯自由能值相對較高，而3撇端吉布斯自由能較低 8：引物的5撇端可以修飾了，3撇端不能修飾 9：擴(kuò)增產(chǎn)物的單鏈不能形成二級結(jié)構(gòu) 10：引物應(yīng)具有特異性 |
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2樓2013-09-12 08:32:22
俊鋒
新蟲 (初入文壇)
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3樓2016-02-29 10:27:09
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