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引物設計的原則 已有2人參與
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引物設計是最基礎的分子實驗的必修課。引物設計一般情況下需要遵守以下原則: 1:引物最好在模板CDNA的保守區(qū)域設計 2:引物長度一般在15-30個堿基之間 3:引物中的GC含量一般在40%-60%之間,Tm值最好接近72攝氏度 4:引物中3撇段要避開密碼子的第三位,最好選擇T開頭 5:堿基要隨機分配,盡量不要出現(xiàn)連續(xù)的三個一致。 6:引物自身及引物之間不存在堿基互補配對 7:引物的5撇端和中間的吉布斯自由能值相對較高,而3撇端吉布斯自由能較低 8:引物的5撇端可以修飾了,3撇端不能修飾 9:擴增產(chǎn)物的單鏈不能形成二級結構 10:引物應具有特異性 |

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