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蘭羊羊銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助RNA提取后 PCR為啥跑不出來
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| 提取RNA 很好 小膠檢測條帶很清楚，為啥跑RT-PCR 用的引物是隨機(jī)引物Radom. rapad-PCR用的隨機(jī)錨定配對的，，為啥檢測不出來?xiàng)l帶啊，求大神指點(diǎn)啊 |
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3樓2013-09-19 19:48:43
8樓2013-09-22 18:34:04
bullfrog325
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2樓2013-09-14 21:50:32
蘭羊羊
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5樓2013-09-21 10:36:49
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你的RNA中存在較高含量的多酚類物質(zhì)，致使你的反轉(zhuǎn)錄酶失活，這是你進(jìn)行PCR失敗的主要原因。 建議方法：使用CTAB-LiCl法提取RNA，此種方法國外已經(jīng)發(fā)了很多文章，你可以查一下。目前，植物RNA的提取要難于動物，原因在于植物細(xì)胞中有著過多的植物多酚，如蘋果、棉花。你可以查一下相關(guān)資料。另外，你現(xiàn)在所提取的RNA如果真如前面我所講的情況，基本已無法補(bǔ)救，多酚與糖、蛋白質(zhì)、核酸緊密絡(luò)合，是無法分開的。RNA在水中的溶解度為40微克/微升，具備較高的溶解能力。 |
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蘭羊羊6樓2013-09-21 10:42:39
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7樓2013-09-22 08:29:14
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9樓2013-09-22 20:34:13
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10樓2013-09-22 20:51:48
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