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蘭羊羊

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[求助] 求助RNA提取后 PCR為啥跑不出來(lái)

提取RNA 很好小膠檢測(cè)條帶很清楚，為啥跑RT-PCR 用的引物是隨機(jī)引物Radom. rapad-PCR用的隨機(jī)錨定配對(duì)的，，為啥檢測(cè)不出來(lái)?xiàng)l帶啊，求大神指點(diǎn)啊

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1樓 2013-09-14 21:44:52

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蘭羊羊

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8樓: Originally posted by LRY111 at 2013-09-22 18:34:04
老板并不是什么都懂，我之前用的是Invivogen TRIZOL，但是出了問(wèn)題，對(duì)于RNA提取我研究了半年，才終于搞清楚。如果你能夠用TRIZOL提取出RNA，那么建議在沉淀時(shí)減少加入異丙醇的量，希望能夠?qū)δ阌兴鶐椭?..

非常感謝，你們用的那個(gè)反轉(zhuǎn)錄試劑盒是什么牌子的？

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9樓2013-09-22 20:34:13

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bullfrog325

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蘭羊羊: 金幣+1, ★有幫助, 如果用β-actin作為內(nèi)參，你的反應(yīng)體系和程序是什么呀？ 2013-09-14 22:18:16
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩。從根本去入手 2013-09-15 13:43:32

做一個(gè)看家基因試試, 要是還沒(méi)有產(chǎn)物的話考慮是不是反轉(zhuǎn)錄做失敗了

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2樓2013-09-14 21:50:32

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LRY111

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gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2013-09-20 00:55:10

應(yīng)該是你的RNA純度較低，含有多酚類(lèi)雜質(zhì)以至于反轉(zhuǎn)錄酶失活了，建議測(cè)定一下260/230是否大于2.0

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3樓2013-09-19 19:48:43

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引用回帖:

3樓: Originally posted by LRY111 at 2013-09-19 19:48:43
應(yīng)該是你的RNA純度較低，含有多酚類(lèi)雜質(zhì)以至于反轉(zhuǎn)錄酶失活了，建議測(cè)定一下260/230是否大于2.0

不大于2，測(cè)的才是1點(diǎn)幾

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4樓2013-09-21 08:47:19

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