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wangliually新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
DNA提取時(shí)有RNA污染
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我提取植物的DNA出現(xiàn)嚴(yán)重的RNA污染，這是為什么？我采用的是NY1485-4-2010的CTAB有機(jī)法，沒(méi)有加RNA酶。請(qǐng)問(wèn)RNA酶是必須加的嗎？傳統(tǒng)的酚氯仿方法中去除RNA的是哪一步？采用國(guó)標(biāo)的方法如果不加RNA酶的話(huà)可否除去RNA污染？ 20131009有機(jī)法.JPG |
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wangliually
新蟲(chóng) (初入文壇)
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7樓2013-10-11 21:39:42
xl_dut
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wangliually: 金幣+5, ★有幫助 2013-10-11 21:35:57
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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加入適量的RNA酶，37℃消化30-45min就好了！ 傳統(tǒng)的堿裂解法提取DNA時(shí)也需要加入一定量的RNase的，雖然堿性條件下RNA會(huì)發(fā)生自動(dòng)降解，但細(xì)胞內(nèi)的RNA豐度較高，還是需要加入一定量的RNase的。試劑盒提供的方法一般是在溶液I中加入少量RNase，可以取得較好的去除RNA效果，也可以在提取的最后一步加入RNase。 |
2樓2013-10-11 12:22:35
淘淘279
銅蟲(chóng) (小有名氣)
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3樓2013-10-11 13:38:28
cicelyzh
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4樓2013-10-11 14:45:34
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