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lanlanbetty

金蟲 (初入文壇)

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[求助] Tricine SDS-PAGE-溴酚藍比蛋白跑得快

我最近在做Tricine SDS-PAGE，使用SDS-PAGE的樣品緩沖溶液，使用16.5%分離膠（AB-6，加尿素和不加尿素），10%夾層膠（AB-6），4%濃縮膠（AB-6與AB-3），先30V跑1h，100V跑至電泳結(jié)束（約4h)，使用考馬斯亮藍R-250染色并脫色后發(fā)現(xiàn)條帶都集中與夾層膠與分離膠的上部，之后有使用15.5%分離膠（AB-6），10%夾層膠（AB-3），4%濃縮膠（AB-3）做相同試驗，也出現(xiàn)類似結(jié)果，真心很上火，有木有大俠出現(xiàn)過類似的情況，指導小妹一下，不勝感激啊

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1樓 2013-10-12 08:56:25

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ammingzhi

金蟲 (正式寫手)

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【答案】應助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
lanlanbetty: 金幣+5, ★有幫助 2013-10-29 12:20:08

是不是你的原料分子量太大，分離膠濃度太高，跑不進分離膠里面去，建議查閱下文獻，看看分離膠濃度是不是合適。

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回復此樓

心懷感恩

2樓2013-10-12 09:34:48