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TLR7的蛋白表達
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各位前輩，小輩最近在做小鼠肺組織的TLR7（140kd）的蛋白表達，上樣量試過40微克，因為在140kd的位置沒有出現(xiàn)條帶，因此加大上樣量80微克，用的是10%的分離膠，4%濃縮膠，電泳：濃縮膠80V45min，分離膠120V2h，轉(zhuǎn)膜：300ma2.5h，在冰盒中進行，脫脂牛奶封閉：2h，一抗4度過夜1:500,1:1000，1:1500,1:2000，均試過，二抗1:20000，都沒有在140kd的位置出現(xiàn)條帶，在50,100kd有出現(xiàn)條帶，說明書上也在50,100kd標有條帶，用的是CST的抗體，是兔多克隆抗體，請問各位前輩是什么原因?qū)е?40kd的位置沒有出現(xiàn)條帶，請大家?guī)兔Ψ治鲆幌�，不勝感激！圖中最左邊是marker，第一條條帶是170kd,第二條130kd,第三條100kd,第四條70kd,第五條55kd,第六條40kd TLR7.jpg 合并m.jpg 合并marker.jpg |
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2樓2014-06-11 17:13:33
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