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天天54321鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
高效液相色譜基線不穩(wěn)問(wèn)題
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用60比40的甲醇水做流動(dòng)相，用乙酸調(diào)PH為3.2，紫外檢測(cè)器，為什么基線總是走不穩(wěn)？謝謝各位了，，,. [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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宋全偉
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
crity328: 金幣+1, 感謝交流，歡迎常來(lái)~ 2013-11-05 19:28:42
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可能存在以下原因: 1、柱溫波動(dòng)。（即使是很小的溫度變化 都會(huì)引起基線的波動(dòng)。通常影響示差檢測(cè) 器、電導(dǎo)檢測(cè)器、較低靈敏度的紫外檢測(cè) 器或其它光電類檢測(cè)器。） 1、控制好柱 子和流動(dòng)相的溫度，在檢測(cè)器之前使用熱 交換器圖 2、流動(dòng)相不均勻。（流動(dòng)相條件變化引 起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。） 2 、使用HPLC級(jí)的溶劑，高純度的鹽和添 加劑。流動(dòng)相在使用前進(jìn)行脫氣，使用中 使用氦氣。 3、流通池被污染或有氣體 3、用甲醇或 其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。如有需要， 可以用1N的硝酸。（不要用鹽酸） 4、檢測(cè)器出口阻塞。（高壓造成流通池 窗口破裂，產(chǎn)生噪音基線） 4、取出阻塞 物或更換管子。參考檢測(cè)器手冊(cè)更換流通 池窗。 5、流動(dòng)相配比不當(dāng)或流速變化 5、更改 配比或流速。為避免這個(gè)問(wèn)題可定期檢查 流動(dòng)相組成及流速。 6、柱平衡慢，特別是流動(dòng)相發(fā)生變化時(shí) 6、用中等強(qiáng)度的溶劑進(jìn)行沖洗，更改流 動(dòng)相時(shí)，在分析前用10-20倍體積的新流 動(dòng)相對(duì)柱子進(jìn)行沖洗。 7、流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配 成 7、檢查流動(dòng)相的組成。使用高品質(zhì)的 化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑 8、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)（高K 值）以 饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個(gè)逐步 升高的基線。 8、使用保護(hù)柱，如有必要 ，在進(jìn)樣之間或在分析過(guò)程中，定期用強(qiáng) 溶劑沖洗柱子。 9、使用循環(huán)溶劑，但檢測(cè)器未調(diào)整。 9 、重新設(shè)定基線。當(dāng)檢測(cè)器動(dòng)力學(xué)范圍發(fā) 生變化時(shí)，使用新的流動(dòng)相。 10、檢測(cè)器沒(méi)有設(shè)定在最大吸收波長(zhǎng)處，將波長(zhǎng)調(diào)整至最大吸收波長(zhǎng)處 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
7樓2013-11-05 15:18:22
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
費(fèi)姚永芬: 金幣+2, 謝謝應(yīng)助，歡迎常來(lái)分析版 2013-11-06 13:30:10
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沖系統(tǒng)可以選用水+100%甲醇+水這樣簡(jiǎn)單沖一下. 基線不穩(wěn),像你說(shuō)的這么多的毛刺,我們前天新到的儀器感覺(jué)基線也是很多毛刺,沖了一天吧就好了. 你可以選擇純甲醇看看基線穩(wěn)不穩(wěn),假如穩(wěn)再試試水+甲醇,還是穩(wěn)的話,那就說(shuō)明你的儀器是正常的.你可以選擇混合流動(dòng)相或者選擇換三氟乙酸調(diào)節(jié)一下pH. |
16樓2013-11-06 06:48:27
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