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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 材料區(qū) » 微米和納米 » 微納加工 » 氨基DNA與羧基CdTe量子點的連接
| 查看: 4796 | 回復: 21 | ||||
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氨基DNA與羧基CdTe量子點的連接
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| 各位大俠，小蟲一直嘗試EDC/NHS連接氨基DNA和羧基CdTe量子點，都沒能成功，參考的文獻做法不大一樣，但原理應該是一致的，不知問題出在哪兒，焦急等待大俠相助！��！我用的緩沖液是PB，活化液pH為6.0，50mM，不另外加鹽；反應液pH為7.4，10mM，另外含有100mM的KCl！嘗試用pH6.0的緩沖液溶解量子點，并加入一定量的EDC/NHS（約100倍于量子點的濃度），經活化后，放置一夜，有黑色顆�；蛐鯛畛恋懋a生，此時還有熒光，當離心后，上清液無熒光，將黑色顆粒超聲分散到pH7.4的緩沖液后，再測沒有熒光了！還嘗試過直接用pH7.4 的緩沖液直接加EDC/NHS活化2h，后加入DNA 的，最后溶液也沒了熒光。前后兩次的溶液都為2mL，量子點濃度約為50nM，DNA為0.75uM！求助各位有經驗的大俠相助，會追加金幣�。�！ |
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 羧基活化EDC|DCC,NHS |
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4樓2013-11-12 14:49:41
lucasone
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【答案】應助回帖
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benpaopinle: 金幣+10, ★★★很有幫助, 有知道了不少！謝謝！ 2013-11-19 10:24:58
benpaopinle: 金幣+10, ★★★很有幫助, 有知道了不少！謝謝！ 2013-11-19 10:24:58
| 第一種情況可以很明確的回答你，羧基穩(wěn)定的量子點（MPA或者TGA），是不能在酸性條件下穩(wěn)定存在的，所以你的6.0的緩沖溶液是不行的，酸性條件下會導致量子點團聚沉淀，然后沒有熒光；你的第二種方法應該是正確的，一般用超濾管先小轉速離心，出去溶液中多余的穩(wěn)定劑或者一些Cd和穩(wěn)定劑的絡合物，然后用7.4的PBS重新分散量子點，隨后加入EDC和NHS攪拌活化，在加入DNA或者抗原抗體攪拌反應，然后4度過夜保存，第二天用紫外，熒光，紅外或者是動態(tài)光散射表征。 |
9樓2013-11-18 14:48:29
12樓2013-11-19 10:40:27
ypgou123
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2樓2013-11-11 21:53:54
匿名
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 本帖僅樓主可見 |
3樓2013-11-12 00:08:51
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真是不好意思，關于這個問題，我也是很迷茫，沒有很好的表征手段！我查過文獻，也詢問過師兄、老師，都沒有什么好的方法啊！比如說從熒光方面，有文獻報道QDs修飾上DNA后表面缺陷減少，熒光強度增強，但也有說熒光強度下降的，比如被DNA猝滅，但并沒有具體說明為什么；熒光發(fā)射位置前后不變或移動很小。有關于紫外的變化，目前我也沒怎么嘗試，因為樣品量太少，沒法處理，但從文獻上看，肯定有DNA的紫外峰，何況還能根據(jù)DNA的吸收強度估算每個量子點上修飾了幾條DNA。除了熒光、紫外，紅外也可以檢測酰胺鍵來判斷是否有修飾上。動態(tài)光散射也可以根據(jù)修飾前后QDs的水力半徑來粗略估計，但樣品肯定是經過離心洗脫后的了。除上面的手段外，我真不知道該怎么表征，TEM和SEM應該看不到量子點表面的DNA啊，我真的也是很糾結...說這么多，也不知道你是怎樣修飾的？希望可以交流一下！ |
5樓2013-11-12 15:15:56
supernatural: 屏蔽內容, 請不要在回帖中留下聯(lián)系方式，這既是版規(guī)也是為了用戶自身的信息安全考慮，聯(lián)系方式可以站內留額O(∩_∩)O~ 2013-11-19 11:17:48
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本帖內容被屏蔽 |
6樓2013-11-13 11:36:29
huterx
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7樓2013-11-17 22:19:25
conanzzz
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8樓2013-11-18 11:49:53
10樓2013-11-19 10:18:58
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