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[求助]
求助：農(nóng)桿菌菌液PCR無陽性
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| 我用大腸桿菌質(zhì)粒電轉(zhuǎn)農(nóng)桿菌感受態(tài)！由于是第一次，轉(zhuǎn)化的過程中不小心復(fù)蘇時放在37度搖床搖了1h，然后涂皿。兩天多之后才長了斑，師兄說轉(zhuǎn)農(nóng)桿菌陽性率高，所以只挑了4個斑，然后又在37度搖了7h，之后才放入28度搖床，搖了12h后吸菌液pcr檢測，無帶。然后再挑6個，28度搖12h，檢測時加上前面的4個一起，還是無帶。設(shè)置的大腸桿菌質(zhì)粒對照都有帶！pcr體系:mix 8ul,引物各0.5ul，菌液1ul，跑的普通的scar程序！ |
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