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mxl831

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[求助] western blot實(shí)驗(yàn)求助

大鼠肝臟樣品-80度保存有一年半左右了，還能做western blot實(shí)驗(yàn)嗎？現(xiàn)在提了蛋白然后在做，但是沒(méi)做出來(lái)，整張膜什么都沒(méi)有，不知道是樣品問(wèn)題還是其他的問(wèn)題。現(xiàn)在的蛋白是凱基的裂解液直接提的，煮過(guò)和沒(méi)煮過(guò)的都做了，煮過(guò)后里面會(huì)有顆粒的沉淀，提取出來(lái)的蛋白離心后也不是完全澄清的液體。

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1樓 2013-11-18 09:50:46

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xiangyu9356

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-80度保存組織一般是3個(gè)月的保質(zhì)期。不建議再做你的這批樣品。

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mxl831

滿堂花醉三千客，更無(wú)一人是知音。

2樓2013-11-18 10:03:52

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daibingling

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首先你可以把整塊膠用考馬斯亮藍(lán)染，看有沒(méi)有條帶，然后再進(jìn)行轉(zhuǎn)膜，如果膠上就沒(méi)有蛋白，轉(zhuǎn)膜真的是浪費(fèi)

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3樓2013-11-18 10:42:48

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引用回帖:

2樓: Originally posted by xiangyu9356 at 2013-11-18 10:03:52
-80度保存組織一般是3個(gè)月的保質(zhì)期。不建議再做你的這批樣品。

還是想再試試看，呵呵，謝謝！

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4樓2013-11-18 11:48:24

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用細(xì)胞裂解液做陽(yáng)性對(duì)照，證明你的抗體是好的

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5樓2013-11-18 20:16:00

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做個(gè)考馬斯亮藍(lán)或麗春紅看看蛋白提的咋樣。

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6樓2014-01-19 23:05:44

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