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wqertyre至尊木蟲 (職業(yè)作家)
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[求助]
求教,融合蛋白表達條件怎么優(yōu)化的 已有1人參與
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| 最近剛剛構(gòu)建好一段基因,在bl21里面表達,分子量大小估計有70KD,我想優(yōu)化一下表達條件,包括IPTG的濃度、誘導時間,還有溫度,本來想設(shè)計正交試驗的,可看了幾篇中文文獻,怎么都沒做正交試驗?zāi)?是沒必要嗎?還是太難做了?坐等大神賜教 |
實驗交流 |

至尊木蟲 (職業(yè)作家)

鐵蟲 (初入文壇)
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依我的經(jīng)驗,蛋白是否表達,表達量高低幾乎都只與蛋白本身有關(guān)。溫度,iptg,誘導時間點通常只是在已有的基礎(chǔ)上提高表達量。 不知道你的蛋白已經(jīng)表達出來了沒,如果表達不出來通常就是要選取表達某一片段進行表達;如果表達出來的話,可以通過降低溫度延長時間獲得可溶性表達蛋白的量。 |

至尊木蟲 (職業(yè)作家)


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