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wqertyre至尊木蟲 (職業(yè)作家)
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[求助]
求教，融合蛋白表達條件怎么優(yōu)化的 已有1人參與
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| 最近剛剛構(gòu)建好一段基因，在bl21里面表達，分子量大小估計有70KD，我想優(yōu)化一下表達條件，包括IPTG的濃度、誘導(dǎo)時間，還有溫度，本來想設(shè)計正交試驗的，可看了幾篇中文文獻，怎么都沒做正交試驗?zāi)�？是沒必要嗎？還是太難做了？坐等大神賜教 |
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recca1016
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【答案】應(yīng)助回帖
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kx444555: 金幣+3, 鼓勵交流 2013-12-06 11:37:40
wqertyre: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-12-16 23:21:38
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依我的經(jīng)驗，蛋白是否表達，表達量高低幾乎都只與蛋白本身有關(guān)。溫度，iptg，誘導(dǎo)時間點通常只是在已有的基礎(chǔ)上提高表達量。 不知道你的蛋白已經(jīng)表達出來了沒，如果表達不出來通常就是要選取表達某一片段進行表達；如果表達出來的話，可以通過降低溫度延長時間獲得可溶性表達蛋白的量。 |
2樓2013-12-06 09:28:08
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3樓2013-12-09 15:47:05
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8樓2014-04-24 20:29:22
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9樓2014-04-24 20:30:27
10樓2014-04-29 11:30:39
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