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wqertyre至尊木蟲 (職業(yè)作家)
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[求助]
求教，融合蛋白表達(dá)條件怎么優(yōu)化的 已有1人參與
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| 最近剛剛構(gòu)建好一段基因，在bl21里面表達(dá)，分子量大小估計(jì)有70KD，我想優(yōu)化一下表達(dá)條件，包括IPTG的濃度、誘導(dǎo)時(shí)間，還有溫度，本來想設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)的，可看了幾篇中文文獻(xiàn)，怎么都沒做正交試驗(yàn)?zāi)�？是沒必要嗎？還是太難做了？坐等大神賜教 |
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依我的經(jīng)驗(yàn)，蛋白是否表達(dá)，表達(dá)量高低幾乎都只與蛋白本身有關(guān)。溫度，iptg，誘導(dǎo)時(shí)間點(diǎn)通常只是在已有的基礎(chǔ)上提高表達(dá)量。 不知道你的蛋白已經(jīng)表達(dá)出來了沒，如果表達(dá)不出來通常就是要選取表達(dá)某一片段進(jìn)行表達(dá)；如果表達(dá)出來的話，可以通過降低溫度延長時(shí)間獲得可溶性表達(dá)蛋白的量。 |
2樓2013-12-06 09:28:08
wqertyre
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4樓2014-04-22 15:30:24
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