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冰雪靈魂木蟲 (著名寫手)
食品科學家族族長
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[求助]
熒光定量PCR如何進行絕對定量？ 已有2人參與
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real-time PCR 分絕對定量和相對定量，我做的是絕對定量。絕對定量需要繪制標準曲線 標曲的恒坐標是基因拷貝數(shù)的對數(shù)值 縱坐標是CT值。 問題一：跑樣品得到CT值后 如何從基因濃度換算回活菌數(shù)。（我做的是要這種PCR測定干酪樣品中雙歧桿菌的活菌數(shù)） 問題二：用標準品做標準曲線。我的標準品就是純培養(yǎng)的雙歧桿菌嗎？從菌體中提取DNA ? 問題三：在四樓人做的都是提rna,我看文獻中寫的都是提DNA，還有文獻提的是將目的基因轉(zhuǎn)到大腸菌的質(zhì)粒中 然后再提質(zhì)粒，有什么區(qū)別？ 問題四：需要特異性引物或者探針，如何設(shè)計？ |
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2樓2019-03-25 08:51:25
粒粒粥呀
金蟲 (著名寫手)
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4樓2019-11-27 10:31:11
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5樓2019-11-27 10:32:27
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