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北京石油化工學院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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ds1986080607

新蟲 (初入文壇)

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專業(yè): 發(fā)育生物學

[求助] NC膜半干轉(zhuǎn)膜已有2人參與

本人最近western試驗很不順利，PVDF轉(zhuǎn)膜后marker和泳道都很淡，漂洗之后marker什么的都看不見了，最后顯影什么也沒有。目的蛋白65KD，用bio-rad半干轉(zhuǎn)，15V，轉(zhuǎn)膜時間60~90min都試過，估計問題還是出在轉(zhuǎn)膜上，想用NC膜試試，聽說NC膜容易轉(zhuǎn)穿，有沒有蟲友用NC膜做過半干轉(zhuǎn)，交流一下轉(zhuǎn)膜經(jīng)驗啊，

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1樓 2013-12-19 15:18:26

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cicelyzh

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專業(yè): 生物化學

【答案】應助回帖

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半干轉(zhuǎn)移不像濕法，需要濾紙、膜、膠的大小一樣，否則轉(zhuǎn)移效率很差。你的15v電流是多少？通常半干轉(zhuǎn)移都是做穩(wěn)流，根據(jù)膠的面積計算電流的。NC膜的條件與PVDF差不多，只是膜比較脆，容易破。

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