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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 正反向測序問題
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正反向測序問題 已有1人參與
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本人最近將一外源片段和質粒利用EcoRV與MluI酶切后連接，挑去單克隆進行測序。分別設計正反向引物，反向引物測序結果顯示目的基因后半部分正確，正向引物測序結果很亂（發(fā)現(xiàn)將正向引物測序結果和反向測序結果align后，這兩個測序序列基本相同，將兩個序列結果assemble測序顯示目的基因后半部分正確，故得不到前半部分結果）。第一次懷疑引物設計出現(xiàn)問題，第二次利用T7通用引物再次正向測，結果同第一次。不知道問題出現(xiàn)在了哪里？ 求高手指教。 [ Last edited by nnbj on 2014-1-3 at 20:11 ] |
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cicelyzh
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2樓2014-01-04 04:03:16
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cicelyzh
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4樓2014-01-06 01:23:54
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5樓2015-04-30 15:35:35
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