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nnbj新蟲 (初入文壇)
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[求助]
正反向測序問題 已有1人參與
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本人最近將一外源片段和質(zhì)粒利用EcoRV與MluI酶切后連接,挑去單克隆進(jìn)行測序。分別設(shè)計正反向引物,反向引物測序結(jié)果顯示目的基因后半部分正確,正向引物測序結(jié)果很亂(發(fā)現(xiàn)將正向引物測序結(jié)果和反向測序結(jié)果align后,這兩個測序序列基本相同,將兩個序列結(jié)果assemble測序顯示目的基因后半部分正確,故得不到前半部分結(jié)果)。第一次懷疑引物設(shè)計出現(xiàn)問題,第二次利用T7通用引物再次正向測,結(jié)果同第一次。不知道問題出現(xiàn)在了哪里? 求高手指教。 [ Last edited by nnbj on 2014-1-3 at 20:11 ] |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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新蟲 (初入文壇)
金蟲 (正式寫手)
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