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sstefsun0630金蟲 (小有名氣)
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[求助]
植物蛋白提取及酶活測定中遇到的若干問題 已有3人參與
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事情是這樣的，因為需要測定CAT，SOD活性等其他實驗，我需要提取植物蛋白： 我取了新鮮的植株（綠色植物小苗），用液氮磨碎后，加入蛋白提取液（試劑盒），混勻（我用了下渦旋機(jī)20秒左右），冰上孵育20——30分鐘。然后16000轉(zhuǎn)4度離心20分鐘。 結(jié)果我的上清是一種棕褐色的液體，這是正常的么？不是應(yīng)該差不多是淺淺的綠色？ 由于一些原因我沒能當(dāng)時就測酶活，而是等了一個半小時。擔(dān)心酶活性受到影響，我把我的樣品放在了冰上（0度左右）。在測酶活之前放置室溫環(huán)境（大概20度左右。結(jié)果測酶活的時候發(fā)現(xiàn)竟然幾乎沒有變化。而且我的樣品在波長270 nm左右有較強的吸收，所以應(yīng)該是這個影響了我酶活的測定。 所以，請問這種狀況怎么破？我是哪里做的有問題么？求解答困惑~~~ 謝謝！謝謝�。�！ |
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