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qin.xiaoyue鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
TAIL-PCR的相關(guān)問題 已有2人參與
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我用的載體是根據(jù)pPZPY122載體改造的,稱為pF3PZPY122,不知道其具體載體序列。做TAIL-PCR時(shí)用的方法是根據(jù)Fusion primer and nested integrated PCR (FPNI-PCR): a new high-efficiency strategy for rapid chromosome walking or flanking sequence cloning文獻(xiàn)報(bào)道的FPNI-PCR方法。特異引物的設(shè)計(jì)是根據(jù)pPZPY122載體序列靠近RB區(qū)域設(shè)計(jì)的向外擴(kuò)增的引物,經(jīng)過3輪PCR之后得到了1000bp左右很特異的條帶,但是測(cè)序卻得到了RB上游的載體上的序列(距離RB約2K),有人遇到過相同的情況嗎?求大神幫忙。 |
鐵桿木蟲 (正式寫手)

鐵蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
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