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求助細胞培養(yǎng)液的區(qū)別 已有7人參與
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最近在做細胞毒性試驗標準要求用MEM培養(yǎng)液，但我手頭只有RPMI 1640培養(yǎng)液，請問我可以用RPMI 1640培養(yǎng)液替代嗎？ 我養(yǎng)的細胞是鼠成纖維細胞，采用MTT染色法試驗。 |
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2樓2014-03-05 15:48:45
3樓2014-03-05 16:56:17
yipan 
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【答案】應(yīng)助回帖
| 成纖維細胞的原代培養(yǎng)可用酶消化法或組織塊法，其中組織塊法又因其操作簡便、條件易于控制而應(yīng)用更為普遍。通常，以酶消化法獲得的成纖維細胞懸液在接種后5～10min即可見細胞以偽足初期附著，與底物形成一些接觸點；然后細胞逐漸呈放射狀伸展，胞體的中心部分亦隨之變扁平；最快者大約在接種后30min，細胞貼附底物即較為完全，呈現(xiàn)成纖維細胞的形態(tài)。采用組織塊法則大約在接種后2～3天到1周左右，在接種的皮膚組織塊周圍長出細胞。待細胞融合成片，鋪滿培養(yǎng)容器底壁大部分時即可進行傳代。一般都采用胰蛋白酶(trypsin)，將成纖維細胞從底壁消化下來后分瓶作傳代培養(yǎng)。成纖維細胞在體外培養(yǎng)條件下能保持良好的分裂增殖能力。細胞分裂時變?yōu)榍蛐�；分裂后又平鋪在附著物的表面成為有突起的扁平細胞。體外培養(yǎng)的成纖維細胞，其生命期限與物種等因素有關(guān)。 |
4樓2014-03-10 11:03:39
jurkat.1640
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5樓2014-03-11 15:53:05
6樓2014-03-12 08:18:17
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8樓2014-03-12 09:09:17
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10樓2014-03-15 11:28:12
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