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[求助]
求助細(xì)胞培養(yǎng)液的區(qū)別 已有7人參與
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最近在做細(xì)胞毒性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)要求用MEM培養(yǎng)液，但我手頭只有RPMI 1640培養(yǎng)液，請(qǐng)問我可以用RPMI 1640培養(yǎng)液替代嗎？ 我養(yǎng)的細(xì)胞是鼠成纖維細(xì)胞，采用MTT染色法試驗(yàn)。 |
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孟安格
新蟲 (初入文壇)
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7樓2014-03-12 08:52:01
2樓2014-03-05 15:48:45
3樓2014-03-05 16:56:17
yipan 
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【答案】應(yīng)助回帖
| 成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)可用酶消化法或組織塊法，其中組織塊法又因其操作簡(jiǎn)便、條件易于控制而應(yīng)用更為普遍。通常，以酶消化法獲得的成纖維細(xì)胞懸液在接種后5～10min即可見細(xì)胞以偽足初期附著，與底物形成一些接觸點(diǎn)；然后細(xì)胞逐漸呈放射狀伸展，胞體的中心部分亦隨之變扁平；最快者大約在接種后30min，細(xì)胞貼附底物即較為完全，呈現(xiàn)成纖維細(xì)胞的形態(tài)。采用組織塊法則大約在接種后2～3天到1周左右，在接種的皮膚組織塊周圍長(zhǎng)出細(xì)胞。待細(xì)胞融合成片，鋪滿培養(yǎng)容器底壁大部分時(shí)即可進(jìn)行傳代。一般都采用胰蛋白酶(trypsin)，將成纖維細(xì)胞從底壁消化下來后分瓶作傳代培養(yǎng)。成纖維細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下能保持良好的分裂增殖能力。細(xì)胞分裂時(shí)變?yōu)榍蛐�；分裂后又平鋪在附著物的表面成為有突起的扁平�?xì)胞。體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞，其生命期限與物種等因素有關(guān)。 |
4樓2014-03-10 11:03:39
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