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Yocan2012新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
植物基因組提取 已有4人參與
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最近在做植物基因組提取，用來(lái)測(cè)序建庫(kù)使用的。使用的是植物（菊科）的種子作為材料，液氮研磨破碎，CTAB法提取，除了沒(méi)有使用Tris飽和酚外，其他完全按照CTAB法進(jìn)行操作。結(jié)果見(jiàn)圖。此外，有時(shí)候提取到的只有250 bp大小的片段，有的時(shí)候根本什么也提取不到。但是，在年前做預(yù)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候提取的效果是非常好的，20 kb的條帶非常好。現(xiàn)在卻怎么都重復(fù)不出來(lái)。求高人指點(diǎn)。 上圖為現(xiàn)在的情況，下圖為預(yù)實(shí)驗(yàn)提取的情況，所用maker均為T(mén)akara DL15000。 未標(biāo)題-1.jpg 提取-1.png [ Last edited by Yocan2012 on 2014-3-18 at 13:18 ] |
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yipan 
銅蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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3樓2014-03-18 16:14:50
starseeker
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2樓2014-03-18 16:00:55
zhenwuhuang
至尊木蟲(chóng) (文學(xué)泰斗)
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Yocan2012(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-03-19 16:06:09
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Yocan2012(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-03-19 16:06:09
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植物DNA的提取技術(shù)及注意事項(xiàng) http://chinaaoju.blog.163.com/bl ... 961201211136154169/ |
4樓2014-03-18 16:33:00
花雨sky
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【答案】應(yīng)助回帖
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Yocan2012(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-03-19 16:07:17
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Yocan2012(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-03-19 16:07:17
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用不用tris飽和酚問(wèn)題不是很大，我沒(méi)有用也還是提出來(lái)了 1、藥品有沒(méi)有問(wèn)題 2、研磨是否充分，這個(gè)很關(guān)鍵，如果研磨不充分的話，就得不到CTAB-核酸復(fù)合物，自然就看不到DNA了 3、浸提、抽提等各個(gè)步驟的動(dòng)作一定要溫和。 這有個(gè)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，希望能對(duì)你有幫助http://huanansu211.blog.163.com/ ... 544720105291551541/ |
5樓2014-03-18 16:38:54
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