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Yocan2012新蟲 (小有名氣)
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[求助]
植物基因組提取 已有4人參與
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最近在做植物基因組提取，用來測序建庫使用的。使用的是植物（菊科）的種子作為材料，液氮研磨破碎，CTAB法提取，除了沒有使用Tris飽和酚外，其他完全按照CTAB法進行操作。結(jié)果見圖。此外，有時候提取到的只有250 bp大小的片段，有的時候根本什么也提取不到。但是，在年前做預(yù)實驗的時候提取的效果是非常好的，20 kb的條帶非常好�，F(xiàn)在卻怎么都重復(fù)不出來。求高人指點。 上圖為現(xiàn)在的情況，下圖為預(yù)實驗提取的情況，所用maker均為Takara DL15000。 未標(biāo)題-1.jpg 提取-1.png [ Last edited by Yocan2012 on 2014-3-18 at 13:18 ] |
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zhenwuhuang
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【答案】應(yīng)助回帖
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Yocan2012(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2014-03-19 16:06:09
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Yocan2012(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2014-03-19 16:06:09
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植物DNA的提取技術(shù)及注意事項 http://chinaaoju.blog.163.com/bl ... 961201211136154169/ |
4樓2014-03-18 16:33:00
starseeker
銅蟲 (初入文壇)
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2樓2014-03-18 16:00:55
yipan 
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3樓2014-03-18 16:14:50
花雨sky
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【答案】應(yīng)助回帖
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Yocan2012(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2014-03-19 16:07:17
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Yocan2012(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2014-03-19 16:07:17
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用不用tris飽和酚問題不是很大，我沒有用也還是提出來了 1、藥品有沒有問題 2、研磨是否充分，這個很關(guān)鍵，如果研磨不充分的話，就得不到CTAB-核酸復(fù)合物，自然就看不到DNA了 3、浸提、抽提等各個步驟的動作一定要溫和。 這有個經(jīng)驗總結(jié)，希望能對你有幫助http://huanansu211.blog.163.com/ ... 544720105291551541/ |
5樓2014-03-18 16:38:54
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