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厚德求是木蟲 (著名寫手)
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[求助]
求助!蛋白質(zhì)同源建模,模板不是同工酶,而且相似性低于30%,下一步怎么辦? 已有4人參與
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求助! 現(xiàn)在課題的主要目的是通過理性設計來提高酶蛋白的熱穩(wěn)定性,主要的方法是定點突變酶非保守序列上的氨基酸來增加氫鍵,鹽橋(或者二硫鍵)等。 因為我的模板蛋白是沒有已知三維結構的,所以需要用同源建模的方法來模擬出我的蛋白質(zhì)三級結構,預測保守序列(活性中心)并避開它們在其他地方做突變,再利用計算機模擬突變的結果,選擇能夠突變的氨基酸,再進行試驗驗證。 我目前用來建模的軟件是DS里面的同源建模板塊,有文獻報道過對我這個酶進行同源建模,用的是Swiss......我覺得這些人報道的不見得可信,因此我想自己建?纯础 現(xiàn)在的問題是,通過DS模板搜索版塊得到的模板(30%相似性,但此模板和文獻報道中用過的一樣)和我的酶不是同工酶!用這個模板做的模型結果里面的蛋白質(zhì)一級結構改變了,少了17個氨基酸,而且氨基酸排列順序也變了!這樣就沒法做結構評價了!更不要說模擬突變其他位點了,而且模擬出來的活性中心也是很奇怪的梭型而不是圓形,所以我猜用現(xiàn)在這樣的方法是沒法做出來了。 所以,我想要保證蛋白質(zhì)一級結構不變,要用什么方法繼續(xù)建模?求助 |
木蟲 (著名寫手)
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木蟲 (著名寫手)
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