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夏以含新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
超長(zhǎng)引物PCR求助 已有1人參與
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老板在國(guó)外帶回一個(gè)新質(zhì)粒要我們做，首先要做一個(gè)超長(zhǎng)引物的PCR過(guò)程，上游引物長(zhǎng)達(dá)116個(gè)堿基，下游引物也有43個(gè)堿基，請(qǐng)問(wèn)： 1.這樣的引物要如何分析確定是否可以用于PCR？ 2.PCR程序又要怎么設(shè)置？？ 望高手賜教��！不勝感激！ |
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d00614028
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
laozuzunzhe: 金幣+3, 鼓勵(lì)應(yīng)助！ 2014-04-02 22:53:23
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| 沒(méi)必要合成這么長(zhǎng)的引物哦，合成這么長(zhǎng)不僅價(jià)格貴，而且還不一定穩(wěn)定，關(guān)于這個(gè)116bp的，你可以合成3條引物，方向分別為正反正，每條各50bp，overlap17bp，就可以滿足你的116bp啦，最后面你的43bp照常設(shè)43bp反向，四條引物混合你的模板同時(shí)PCR，程序和正常一樣，可以得到你的預(yù)期產(chǎn)物。 |
2樓2014-04-01 13:32:00
夏以含
新蟲(chóng) (初入文壇)
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3樓2014-04-02 08:48:58
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