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wangtao89hf新蟲 (初入文壇)
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[求助]
利用DpnI酶切法構(gòu)建缺失突變質(zhì)粒 已有2人參與
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| 我對一個操縱子的一段序列的十個部分要分別缺失突變，利用DpnI酶切反向PCR產(chǎn)物進行缺失，然后轉(zhuǎn)化測序。目前已經(jīng)成功了三個但是有7個多次重復都沒成功。原因從購買新酶，酶切時間，DH5@以及TOP10感受態(tài)細胞都找了，連PCR循環(huán)的次數(shù)也驗證了，而且陰性平板不長，挑單菌落測序又發(fā)現(xiàn)沒有缺失，求高手指導給原因。 |
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pennchem
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2樓2014-04-30 14:45:27
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