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cassiett90新蟲 (初入文壇)
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[求助]
請(qǐng)問在大腸桿菌中表達(dá)蛋白時(shí)會(huì)不會(huì)只表達(dá)一段目的蛋白？怎么解決呢？求高人指點(diǎn) 已有5人參與
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| 我最近一直在試著用大腸桿菌表達(dá)一個(gè)116個(gè)氨基酸的蛋白，前面加了個(gè)132個(gè)氨基酸的sumo標(biāo)簽，再前面是his標(biāo)簽，放在pET28a中表達(dá)，目的蛋白總長(zhǎng)度為27.6kD，但跑膠卻總是只能得到20kD的主條帶，質(zhì)譜顯示只有sumo和那116個(gè)里面的前面一截目的蛋白，后面的都對(duì)不上，但基因測(cè)序沒有一點(diǎn)問題，這可能是為什么呢？蛋白表達(dá)到一半自己停下了？？去表達(dá)其他的了？？怎么會(huì)這樣呢。。求高人指教�。。�！小女子感激不盡�。。� |
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5樓2014-04-13 18:41:51
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