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cassiett90新蟲 (初入文壇)
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[求助]
請問在大腸桿菌中表達(dá)蛋白時會不會只表達(dá)一段目的蛋白?怎么解決呢?求高人指點 已有5人參與
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| 我最近一直在試著用大腸桿菌表達(dá)一個116個氨基酸的蛋白,前面加了個132個氨基酸的sumo標(biāo)簽,再前面是his標(biāo)簽,放在pET28a中表達(dá),目的蛋白總長度為27.6kD,但跑膠卻總是只能得到20kD的主條帶,質(zhì)譜顯示只有sumo和那116個里面的前面一截目的蛋白,后面的都對不上,但基因測序沒有一點問題,這可能是為什么呢?蛋白表達(dá)到一半自己停下了??去表達(dá)其他的了??怎么會這樣呢。。求高人指教。。!小女子感激不盡。! |
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