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瓊脂糖凝膠電泳：同一批樣每次結(jié)果不一致，為什么?_? 已有2人參與
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請大家?guī)臀曳治鲆幌孪旅孢@三張圖： 這三張圖都是同一批PCR產(chǎn)物的，目的條帶大小為400多bp，其中 圖4.21 是pcr結(jié)束后立即跑的；圖new1 圖new2 分別是隔夜后第2，3次跑的。 我自己有以下幾個疑惑： 1.圖4.21 中為什么目的條帶是月牙形的？膠上背景不均我認為可能和沒有沖洗徹底有關(guān)，或者是制膠問題？ 2.圖new1 同一批樣品為什么完全沒有顯示條帶？marker是有的。 3.圖new2 再次跑了之后發(fā)現(xiàn)又有了條帶，但是參差不齊，而且大部分目的條帶不在400bp了，不知道是為什么？ 4.另外空白樣中出現(xiàn)了目的條帶，我不認為我操作中出現(xiàn)了交叉污染�？赡苁鞘裁丛�?qū)е履兀?br /> 另外需要說明的是，我的這些條帶是通過兩步法PCR做出的。即：第一次PCR后取產(chǎn)物加入新的體系中進行第二次PCR，然后來跑膠。因為第一次PCR產(chǎn)物跑膠一直跑不出來，所以我認為是由于我的模板含量在我的樣本中的含量過低。 請大家?guī)臀曳治龇治觯x謝～ new1.jpg new2.jpg 4.21.jpg |
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