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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 核酸提取 » 求分析瓊脂糖凝膠電泳圖
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linglingerl金蟲 (初入文壇)
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[求助]
求分析瓊脂糖凝膠電泳圖 已有4人參與
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求助各位大俠，我剛提取一次質(zhì)粒，跑出來兩條帶，但是最下沿有不甚清晰地一條帶，請問是為什么？如下圖所示： 另外一個比較奇怪的的是，我把質(zhì)粒用一系列濃度的DNase Ⅰ酶切之后跑電泳，上面兩條帶都沒了，只剩下下面的模糊帶，但是為什么會有兩道黑帶呢（如圖2），那又是什么？PS：我用的是6× loading buffer雙染料 |
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liuderong
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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2樓2014-03-09 20:26:00
lvbobo823
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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3樓2014-03-09 21:16:12
【答案】應助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
linglingerl(gyesang代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流！ 2014-03-31 16:08:13
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質(zhì)粒有三種構型。第一種是共價閉合環(huán)狀DNA(covalently close circular DNA，ccc DNA)，它的兩條鏈都保持完整的環(huán)狀結構，通常呈超螺旋構型。第二種是開環(huán)DNA(open circularDNA，oc DNA)，它的雙鏈中的一條保持完整的環(huán)狀結構，另一條單鏈上有一到幾個切口。第三種是線狀DNA，這種質(zhì)粒的雙鏈斷裂呈線狀。這三種構型的同一種質(zhì)粒在瓊脂糖凝膠中電泳時，出現(xiàn)不同的遷移速率，走得最快的是超螺旋構型，其次是線性構型，最慢的是開環(huán)構型。 一般提質(zhì)粒跑膠，都會出現(xiàn)3條帶，質(zhì)粒圖上2條帶很正常。 |
4樓2014-03-10 10:01:30
5樓2014-03-10 11:55:04
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