 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 766 | 回復(fù): 1 | |||
fangmeizh銅蟲 (初入文壇)
|
[求助]
SYBR green表達(dá)，擴(kuò)增效率
|
| 用SYBR green相對定量，自己用5個(gè)梯度做標(biāo)準(zhǔn)曲線，目的基因的擴(kuò)增效率只有87%，內(nèi)參基因有92%，這兩對引物可以做定量表達(dá)分析嗎？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
275求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
招08考數(shù)學(xué)
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
303求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
306求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
考研調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
285求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿北京化工大學(xué)070300 學(xué)碩336求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
318求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 做基因表達(dá)采用熒光定量PCR的步驟
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 求高手指點(diǎn)，熒光定量PCR相對定量法的結(jié)果
已經(jīng)有3人回復(fù)
- QPCR擴(kuò)增曲線異常
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 關(guān)于SYBR Green I的問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- SYBR 熒光定量PCR 陰性對照問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 實(shí)時(shí)熒光定量PCR過程問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- SYBR green 1 real-time PCR 結(jié)果分析
已經(jīng)有4人回復(fù)
- SYBR熒光定量PCR檢測病毒的表達(dá)量，模版的要求
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 熒光定量擴(kuò)增效率問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 熒光定量PCR與巢式PCR能結(jié)合嗎？主要怕擴(kuò)增出同源基因。
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 熒光定量pcr,以及內(nèi)參基因的選擇。
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 相對定量中怎樣提高擴(kuò)增效率
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 請教PCR高手，使用SYBR Green I法進(jìn)行熒光定量PCR對于產(chǎn)物大小有什么要求？
已經(jīng)有21人回復(fù)
- RT-qPCR實(shí)驗(yàn)問題
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 熒光定量sybrgreen染料熒光值大小的問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 定量PCR擴(kuò)增效率過高(SYBR)
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 定量PCR讀取熒光值的步驟需要保持多長時(shí)間？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 實(shí)時(shí)熒光RT-PCR實(shí)驗(yàn)的相關(guān)問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 熒光定量PCR的擴(kuò)增曲線很奇怪，什么原因
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 電泳用和PCR用的SYBR Green I有什么區(qū)別
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】相對熒光定量pcr檢測基因表達(dá)差異問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【分享】realtime pcr 個(gè)人經(jīng)驗(yàn)分享
已經(jīng)有41人回復(fù)
kellytan001
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 14 (小學(xué)生)
- 金幣: 219.5
- 散金: 17
- 紅花: 4
- 帖子: 260
- 在線: 22.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 3108448
- 注冊: 2014-04-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 農(nóng)業(yè)昆蟲學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
| 熒光定量PCR分析基因表達(dá)有兩種方法：1、是標(biāo)準(zhǔn)品法。這種方法要求有已經(jīng)知道的拷貝數(shù)。不需要內(nèi)參。不同拷貝數(shù)得到不同ct值。做出方程計(jì)算未知樣品的拷貝數(shù)。2、是相對內(nèi)參方法。這種方法要求內(nèi)參，并且每組要分別對應(yīng)內(nèi)參，分析數(shù)據(jù)時(shí)將內(nèi)參減去。不需要標(biāo)準(zhǔn)品。樓主說的標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該是這樣理解的：對于PCR擴(kuò)增，無法達(dá)到100%。所以為了保證反應(yīng)體系具備很好的擴(kuò)增效率（重點(diǎn)取決于引物的好壞），我們就嘗試做標(biāo)準(zhǔn)曲線檢測反應(yīng)體系的擴(kuò)增效率。delta delta統(tǒng)計(jì)方法的使用要求擴(kuò)增效率達(dá)到95%-105%之間。3、擴(kuò)增效率的做法：就是用任意一組的cDNA進(jìn)行10濃度稀釋，加入引物。一般為5-7個(gè)梯度，每個(gè)梯度為4個(gè)副孔。完成后pcr儀器會(huì)給你一個(gè)曲線和方程。求出斜率計(jì)算出擴(kuò)增效率，嚴(yán)格上講如果不在95%-105%之間是需要換引物的。 |
2樓2014-05-04 12:20:04
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 fangmeizh 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 招08考數(shù)學(xué) +3 | laoshidan 2026-03-20 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +5 | 安憶靈 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑院校信息 +5 | CX 330 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[基金申請] 山東省面上項(xiàng)目限額評審 +4 | 石瑞0426 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南大，0703化學(xué)，分?jǐn)?shù)336，求調(diào)劑 +3 | 收到VS 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 13341 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求助 +5 | 夢里的無言 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 余意卿 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑 +12 | yangfz 2026-03-17 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 初始318分求調(diào)劑（有工作經(jīng)驗(yàn)） +3 | 1911236844 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 臨澤境llllll 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 22408 344分 求調(diào)劑 一志愿 華電計(jì)算機(jī)技術(shù) +4 | solanXXX 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +7 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩297已過四六級(jí)求調(diào)劑推薦 +11 | adaie 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +4 | Stella_Yao 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑，是學(xué)校就去 +8 | sllhht 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +6 | lemonzzn 2026-03-16 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +5 | pupcoco 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 11408 一志愿西電，277分求調(diào)劑
+3
|
zhouzhen654 2026-03-16 | 3/150 |
|