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請教鈣蛋白酶酶活的計算問題。
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Calpain活性測定 將待測樣品經(jīng)適度稀釋后,取樣品0.5ml,加1.5ml反應(yīng)混合液(100mMTris、10mMMCE、5mg/mlCasein-Hamrnerstein,用醋酸調(diào)pH至7.5),反應(yīng)以添加150μl 0.1M CaCl2開始,以添加150μl 0.2M EDTANa2為對照,反應(yīng)(25℃,60min),后加2m1 5%三氯乙酸終止反應(yīng),離心(4,000×gmax、30min),測上清在278nm處的吸光度,所得值即為酶活單位。 一個單位的Calpain活性定義為25℃,反應(yīng)60min,在278nm下,增加1.0吸光值單位催化反應(yīng)所需酶的量。 已測定其相關(guān)吸光度A值以及其蛋白濃度mg/ml。 曾經(jīng)看過相關(guān)文獻(xiàn)上其酶活用U來表示,但不知道U是如何計算出來的?。還有些文獻(xiàn)上用Μ/ml來表示其活性,依然不知道是如何計算的??。 |
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