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我的RT-CR有什么問題 已有2人參與
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上普通的PCR驗證過引物，一個是GAP，一個是ALP， 片段都是200bp， 都沒有問題，可以P出來。但是一上RT-PCR就不行了，實驗組的GAP和ALP的Ct值是5左右，直接在第四個循環(huán)的時候，就已經(jīng)飆上去了，對照組的GAP也不行，Ct值也很低，就只有對照組的ALP的Ct值相對正常一些，在23左右，求問是什么原因，我已經(jīng)做了六遍了，排除了加樣問題，孔污染問題，引物質(zhì)量問題等等。 PS， 我的cDNA是用6ug的RNA反轉(zhuǎn)錄的，不知道是不是因為這個問題，反轉(zhuǎn)錄酶是TAKARA的，RT-PCR的SYBR是Bio-rad的 |
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gyesang
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2樓2014-05-08 14:46:26
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