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lvsunjian新蟲 (小有名氣)
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[交流]
His標(biāo)簽蛋白純化后，有雜帶 已有6人參與
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菌液誘導(dǎo)表達(dá)過夜后，用PBS懸浮細(xì)胞，超聲破碎。 離心后取上清液上柱（生工的柱子）。 用10ml, Ni-Native-0平衡； 上樣； 再用5ml, Ni-Native-20洗脫，得到3管樣品； 接下來用5ml, Ni-Native-250洗脫，得到4管樣品； 結(jié)果如下： Marker，陰性對照，陽性對照，N20-1，N20-2，N20-3，N250-1，N250-2，N250-3，N250-4，沒管收集1ml。 我想知道，雜蛋白是如何去除的？是通過低濃度的Ni-Native逐步洗脫的還是？ 用Ni-Native-0，20，50，100，250，我怕把樣品都洗脫沒了~ 1.jpg |
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