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a1059277金蟲 (初入文壇)
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[求助]
關于原核表達腸激酶切，做了兩次了都沒切開。 已有2人參與
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最近在用PET30a表達了一個蛋白，到了腸激酶酶切這一步卡住了，切了兩次了都沒切開。 目的蛋白50KDa左右，切除后應該是43kDa左右（His標簽大概7kDa），但是蛋白電泳圖跟對照和marker都一致在50。 我的蛋白液100ml左右，用了兩次100ul的腸激酶了（總共200ul），酶切條件是22°，16h。 各位幫忙分析下原因，謝謝咯。 |
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a1059277
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3樓2014-05-26 11:05:15
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5樓2014-05-26 14:45:39
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