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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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liyaohui1990

木蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] pet28和pet21表達(dá)的蛋白對(duì)于蛋白結(jié)晶的區(qū)別已有3人參與

各位蟲(chóng)友，有誰(shuí)做過(guò)蛋白結(jié)晶嗎？我正在考慮是用pET28還是pET21作為我的表達(dá)載體來(lái)表達(dá)我的目的蛋白。pET28表達(dá)我的目的蛋白的話(huà)會(huì)附帶上兩個(gè)His標(biāo)簽，可能導(dǎo)致我的蛋白過(guò)大，而pET21表達(dá)出來(lái)的目的蛋白酶活性沒(méi)有pET28的高。我正在考慮用哪個(gè)載體表達(dá)更好？各位蟲(chóng)友給點(diǎn)建議啊!感激不盡！

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1樓 2014-06-06 10:20:40

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younghe

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【答案】應(yīng)助回帖

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引入一個(gè)3C或者TEV酶切位點(diǎn)到28a的his后面，就可以把標(biāo)簽切除了

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3樓2014-06-06 16:19:11

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飛約瘋?cè)嗽?/a>

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【答案】應(yīng)助回帖

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gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-06-06 15:28:37

好好看看圖譜就知道了“
http://wenku.baidu.com/link?url= ... UW92jx2V0E8DtOxCg0S

http://wenku.baidu.com/link?url= ... lxuAusI1z_vLAYhwBu7

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人生貴在行動(dòng)，遲疑不決時(shí)，不妨先邁出小小一步。

2樓2014-06-06 15:17:48

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liyaohui1990

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引用回帖:

2樓: Originally posted by 飛約瘋?cè)嗽?/i> at 2014-06-06 15:17:48
好好看看圖譜就知道了“
http://wenku.baidu.com/link?url=Dp3jmdNN_yhLb_f0wk0Dc9vQy0GTLLOMuym1FVEs7xrF38K_JHTAe4n0Gp3UKJ3EuhJ8jk9amA0j-UfrMvsjk5_GUW92jx2V0E8DtOxCg0S

http://wenku.baidu.com/link?ur ...

能稍微解釋一下嗎？比如我是不是要用凝血酶切除前面的肽段啊?但是我的目的蛋白酶本身不是很穩(wěn)定，我怕這樣一折騰，我的酶會(huì)喪失比較多的酶活性。

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4樓2014-06-07 14:11:05

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引用回帖:

3樓: Originally posted by younghe at 2014-06-06 16:19:11
引入一個(gè)3C或者TEV酶切位點(diǎn)到28a的his后面，就可以把標(biāo)簽切除了

您好，請(qǐng)問(wèn)這個(gè)怎么引入呢？能稍微具體點(diǎn)嗎？

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5樓2014-06-07 14:11:41

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