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求助做反向PCR的高手們 已有1人參與
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我做的反向PCR,如果按照擴(kuò)增方向是正義鏈5'到3'方向設(shè)計(jì)的引物,測出來的序列的5'端應(yīng)該能和正義鏈3'端的序列拼接上才對呀,為什么測序出來拼接不上呢。另外按照上述方向設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增出來的序列的3'端和正義鏈的5'端有200個(gè)堿基覆蓋,相似度是90%,但是擴(kuò)增出來的序列的3'端最后8個(gè)堿基沒有覆蓋到正義鏈,這個(gè)可以說擴(kuò)增出來的3'端和正義鏈的5'端能夠拼接上嘛? 說的有點(diǎn)復(fù)雜,希望大家可以看懂啊。。。。 謝謝大家了~ |
核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |





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新蟲 (初入文壇)



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