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求助做反向PCR的高手們 已有1人參與
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我做的反向PCR，如果按照擴增方向是正義鏈5'到3'方向設計的引物，測出來的序列的5'端應該能和正義鏈3'端的序列拼接上才對呀，為什么測序出來拼接不上呢。另外按照上述方向設計引物擴增出來的序列的3'端和正義鏈的5'端有200個堿基覆蓋，相似度是90%，但是擴增出來的序列的3'端最后8個堿基沒有覆蓋到正義鏈，這個可以說擴增出來的3'端和正義鏈的5'端能夠拼接上嘛？ 說的有點復雜，希望大家可以看懂啊。。。。 謝謝大家了~  |
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 核酸生物學實驗經(jīng)驗 |
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