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[求助]
M13藍(lán)白斑篩選出現(xiàn)了藍(lán)斑和白斑？ 已有4人參與
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我在用JM109大腸桿菌作宿主，將M13mp18 RF I DNA通過化學(xué)轉(zhuǎn)化的方法轉(zhuǎn)入JM109中，于含有IPTG和X-gal的LB培養(yǎng)基上過夜培養(yǎng)，長出來了片狀的藍(lán)斑和點(diǎn)點(diǎn)狀的白斑，想問一下蟲友們，有沒有做過類似的實(shí)驗(yàn)，幫忙分析和指導(dǎo)一下，謝謝！ IMG_20140707_075850.jpg |
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4樓2014-07-07 15:24:27
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 看平板圖片好像整個板都有菌存在，不知是否是圖片問題，或者 可能存在污染或抗生素失效，涂板沒涂均勻可能出現(xiàn)小塊藍(lán)斑，連接效率高，DNA多的話 是有可能基本不存在藍(lán)斑，建議你可以把平板放冰箱4℃放個一天，假陽性的白斑往往會變?yōu)樗{(lán)斑，還有 個人人認(rèn)為i可以重做一次 涂板 的菌液可適當(dāng)減少，然后 最好涂勻，做個對照 看看效果 |
3樓2014-07-07 10:58:25
5樓2014-07-07 17:08:58
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