 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 8949 | 回復(fù): 51 | |||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||||
董莊青年新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
PCR目的條帶太弱 并無非特異性條帶 怎樣改進(jìn)可以使目的產(chǎn)物的量加大 已有7人參與
|
||||
|
最近做PCR很郁悶 如圖： 目的條帶（上面 淺淺的）太弱 引物二聚體（下面)很亮 PCR條件優(yōu)化時(shí)要么帶很淺 要么沒有帶 最后優(yōu)化成下圖所示 帶一直很淺 求解 先謝謝各位！��！ 引物是生工剛合成的 模板是新提的 帶都很亮 PCR體系(25ul)：10×buffer: 2.5ul dNTP-MIX(10mM): 0.5ul 引物（10um)：各1.5ul 模板（4kb): 1ul（150ng左右） Tap DNA Polymerase(5U/ul): 0.5 ul 水:17.5ul PCR程序：94℃ 5min; 94℃ 1min; 58℃ 1min;72℃ 6min;72℃ 10min；共20個(gè)循環(huán):  :cat39 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 分子生化實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)積累 | 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) | Enjoy my life！ |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有63人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 電泳圖引物條帶很亮，目的產(chǎn)物條帶不亮
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 全長(zhǎng)PCR擴(kuò)增的非特異性條帶去不掉咋辦
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 求助，3’RACE無目的條帶只有2000bp左右的非特異性條帶擴(kuò)增！
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 半年了，16S rDNA V3區(qū)PCR產(chǎn)物彌散，疑似比目的條帶大一些些的雜帶？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- race pcr問題，沒有特異性條帶
已經(jīng)有7人回復(fù)
- V3區(qū)pcr出現(xiàn)非特異性條帶怎么辦？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- PCR產(chǎn)物非特異性條帶的去除
已經(jīng)有14人回復(fù)
- PCR擴(kuò)增 非特異性條帶求解
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 第一次PCR產(chǎn)物電泳沒有條帶，請(qǐng)問用同一條引物跑2次PCR，能跑出條帶嗎？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- PCR擴(kuò)增的特異性條帶是啥意思？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- PCR非特異性條帶
已經(jīng)有15人回復(fù)
- SOE pcr目的條帶很暗，非特異條帶很亮？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- PCR產(chǎn)物的電泳條帶出問題了！加了oading buffer和不加loading buffer的大小不一樣�。�
已經(jīng)有12人回復(fù)
- PCR后電泳是特異性條帶，但測(cè)序總是出現(xiàn)結(jié)合問題。怎么辦？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- PCR目的條帶沒跑出，但是跑出了特異性很強(qiáng)的單一條帶，是什么原因呢？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 如果目的條帶跟非特異擴(kuò)增的條帶太近能回收嗎
已經(jīng)有8人回復(fù)
- PCR延伸時(shí)間短可以P的更加明顯，且pCR產(chǎn)物量大條帶會(huì)下墜
已經(jīng)有0人回復(fù)
- PCR后電泳，有目的條帶，也有非特異性條帶，可以切膠純化進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)嗎？
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR產(chǎn)物切膠回收，總是有一條雜帶的大小是目的片段的兩倍大小
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR后沒有目的條帶，有非特異性條帶，求解決辦法？？
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR后的DNA產(chǎn)物跑電泳久了條帶為什么會(huì)消失或變?nèi)酰?/a>
已經(jīng)有12人回復(fù)
董莊青年
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 5.5
- 散金: 1
- 帖子: 28
- 在線: 19.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 3252314
- 注冊(cè): 2014-06-03
- 專業(yè): 生物化學(xué)
9樓2014-07-16 16:51:43
zhangyunjing
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 72 (初中生)
- 金幣: 1513.9
- 紅花: 7
- 帖子: 202
- 在線: 164.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1952690
- 注冊(cè): 2012-08-23
- 性別: MM
- 專業(yè): 理論法學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
董莊青年: 金幣+1 2014-07-16 12:08:46
gyesang: 金幣+2, 應(yīng)助指數(shù)+1, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-07-16 13:03:16
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
董莊青年: 金幣+1 2014-07-16 12:08:46
gyesang: 金幣+2, 應(yīng)助指數(shù)+1, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-07-16 13:03:16
|
引物設(shè)計(jì)的不好，大部分引物都形成引物二聚體了，擴(kuò)增效率肯定低，不放把引物序列傳上，幫你分析一下引物的質(zhì)量如何。 另外，擴(kuò)增的目的條帶是多大？延伸時(shí)間設(shè)置6 min，循環(huán)數(shù)20 cycles，感覺延伸時(shí)間太長(zhǎng)，循環(huán)數(shù)偏少，可以設(shè)置到30-35 cycles。 如果你進(jìn)行長(zhǎng)片段擴(kuò)增的話，有專門的長(zhǎng)片段試劑盒，擴(kuò)增效率很高的。 |
2樓2014-07-16 11:35:14
董莊青年
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 5.5
- 散金: 1
- 帖子: 28
- 在線: 19.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 3252314
- 注冊(cè): 2014-06-03
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2014-07-16 12:22:21
董莊青年
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 5.5
- 散金: 1
- 帖子: 28
- 在線: 19.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 3252314
- 注冊(cè): 2014-06-03
- 專業(yè): 生物化學(xué)
4樓2014-07-16 14:14:47
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 070300化學(xué)319求調(diào)劑 +3 | 錦鯉0909 2026-03-17 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600材料與化工 +4 | 安全上岸！ 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程專碩求調(diào)劑 +3 | 慕寒mio 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語(yǔ)六級(jí)551，有科研經(jīng)歷 +3 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留 +8 | 秋有木北 2026-03-14 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑 +3 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料工程327求調(diào)劑 +3 | xiaohe12w 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科南京大學(xué)一志愿川大藥學(xué)327 +3 | 麥田耕者 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)]
有必要更換申報(bào)口嗎
 20+3
|
fannyamoy 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑一志愿 985 總分 295 +8 | dream…… 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料工程調(diào)劑 +9 | 咪咪空空 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] ［0860］321分求調(diào)劑，ab區(qū)皆可 +4 | 寶貴熱 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 【考研調(diào)劑求收留】 +3 | Ceciilia 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | 一定有學(xué)上- 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 土木第一志愿276求調(diào)劑，科研和技能十分豐富，求新興方向的導(dǎo)師收留 +3 | 土木小天才 2026-03-12 | 3/150 |
|