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doubleping新蟲 (小有名氣)
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V3區(qū)pcr出現(xiàn)非特異性條帶怎么辦?
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我用16S的pcr產(chǎn)物擴(kuò)增V3區(qū),目的片段在250bp左右,但是我擴(kuò)增出來(lái)出現(xiàn)了四條很淡的非特異性條帶,大小在1400-300bp之間,不明白這是為什么?給位大神給點(diǎn)意見吧。。。 我使用體系是2*taq mastermix 15ul,引物 10um/ml 各1ul,模版1ul,ddH2O 12ul,總共30ul,程序是touchdownPCR程序,槍頭和水、離心管都是高溫滅菌過(guò)的,不過(guò)沒有在超凈臺(tái)和冰上操作。 |
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